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雙色SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液(5×,含DTT)
更新時間:2025-04-11   點擊次數:45次

 雙色SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液(,含DTT)是一種用于SDS-PAGE電泳的蛋白上樣緩沖液,具有獨特的雙色設計和含有DTT的特性。以下是對該緩沖液的詳細解析:

一、產品特性

雙色設計:雙色SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液在傳統蛋白上樣緩沖液的基礎上加入了紅色染料,形成了藍色和紅色兩種顏色的混合物。這種設計使得在電泳過程中可以清晰地觀察到蛋白質的遷移情況,同時紅色染料還可以隨蛋白質一起轉移到轉印膜上,用于監視轉膜效率。

含有DTTDTT(二硫蘇糖醇)是一種強還原劑,能夠斷裂蛋白質中的二硫鍵,使蛋白質結構變得松散,從而消除蛋白質結構之間的差異。這有助于在電泳過程中獲得更清晰的蛋白質條帶。

濃度:該緩沖液為5倍濃縮液,使用時需要按照一定比例稀釋。這種設計便于儲存和運輸,同時在使用時可以靈活調整緩沖液的體積。

二、使用方法

溶解與混勻:將雙色SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液從冰箱中取出,室溫或水浴溶解后輕輕搖勻,確保溶液混合均勻。

樣品處理:將適量的蛋白質樣品與緩沖液混合,通常按照一定比例進行(如每4μL蛋白質樣品中加入1μL緩沖液)。混合后,進行加熱變性處理(如95~100℃水浴加熱10分鐘),使蛋白質充分變性。

上樣與電泳:冷卻至室溫后,離心去除可能的沉淀物,取上清液進行上樣。電泳過程中,注意控制電壓和時間,觀察藍色和紅色染料的遷移情況。當藍色染料到達凝膠底部附近時,可以停止電泳。

轉膜與監視:如果需要進行蛋白質轉膜操作,可以利用紅色染料隨蛋白質一起轉移到轉印膜上的特性,監視轉膜效率。

三、注意事項

儲存條件:雙色SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液應存放在-20℃冰箱中保存,避免反復凍融。在儲存過程中,可能會出現SDS沉淀現象,使用前應在溫水中溶解。

安全性:由于該緩沖液中含有DTT等化學成分,具有一定的毒性。在使用過程中應穿戴適當的防護裝備(如實驗服、手套等),避免直接接觸和吸入。

適用性:該緩沖液適用于常規的SDS-PAGE電泳和蛋白質轉膜操作。但請注意,由于含有DTT等還原劑成分,可能不適用于某些特定的實驗條件或蛋白質樣品。

四、產品優勢

清晰的電泳條帶:由于含有DTT成分,能夠斷裂蛋白質中的二硫鍵,使蛋白質結構變得松散,從而在電泳過程中獲得更清晰的蛋白質條帶。

便于觀察與監視:雙色設計使得在電泳過程中可以清晰地觀察到蛋白質的遷移情況;同時紅色染料還可以隨蛋白質一起轉移到轉印膜上,用于監視轉膜效率。

靈活的使用方式:濃度的設計便于儲存和運輸;同時在使用時可以靈活調整緩沖液的體積以滿足不同實驗需求。

 

 


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