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重組組織因子的制備工藝

產(chǎn)品介紹：人組織因子是一個(gè)由 263 個(gè)氨基酸殘基組成的跨膜單鏈糖蛋白。其中氨基端219 個(gè)氨基酸殘基位于細(xì)胞膜外,緊隨其后的23個(gè)氨基酸殘基則穿過(guò)細(xì)胞膜,其余21個(gè)氨基酸殘基位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。正常情況下組織因子不存在于循環(huán)中或不與循環(huán)血液接觸,只有當(dāng)血管壁的完整性遭到破壞時(shí)TF 才暴露于循環(huán)血液,通過(guò)激活凝固級(jí)聯(lián)反應(yīng)發(fā)揮止血作用。

定義：重組組織因子是利用基因工程技術(shù)，將人的組織因子（Tissue Factor, TF）基因片段克隆到適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中，經(jīng)過(guò)表達(dá)、純化等工藝過(guò)程獲得的重組蛋白。

來(lái)源：原始的組織因子是一種跨膜糖蛋白，屬于細(xì)胞因子受體超家族，是凝血因子VII（fVII）的受體，在血管損傷時(shí)觸發(fā)凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)。

產(chǎn)品名稱(chēng)：人重組組織因子

宿主：大腸桿菌

分子量：27.4kDa

純度：≥95%（SDS-PAGE）

緩沖體系：Tris 20mM，NaCl 150mM，PH7.0-7.5

保存條件： -80度

有效期：12個(gè)月

包裝規(guī)格：根據(jù)客戶需求

制備工藝

基因克隆：將人的組織因子基因片段克隆到表達(dá)載體中，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒。

細(xì)胞培養(yǎng)：將重組表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入宿主細(xì)胞（如大腸桿菌、真核細(xì)胞等），進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

發(fā)酵表達(dá)：在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行高密度發(fā)酵，使重組組織因子在宿主細(xì)胞中高效表達(dá)。

純化：通過(guò)免疫親和層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾等純化技術(shù)，獲得高純度的重組組織因子。

注意事項(xiàng)：

1、該產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)使用，不能用于臨床醫(yī)療診斷。

2、反復(fù)凍融會(huì)引起產(chǎn)品降解，建議分裝成需要使用量的等份大小，在需要時(shí)再進(jìn)行解凍。