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α-淀粉-酶水溶液(1%)操作步驟

簡介：

糖原染色是病理學中常規的染色方法之一，其原理是過碘酸能使細胞內乙二醇基氧化成二醛，醛基與雪夫氏溶液起反應，使無色品紅結合成紅色反應，沉著含糖原的細胞結構上，標本上所能顯紅色的糖類主要為多糖包括糖原、糖蛋白、粘多糖和糖脂等。該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。

PAS技術是可檢測不同種類的黏液物質（如糖原、黏蛋白和糖蛋白）的方法，但PAS技術卻不能區別黏蛋白和糖原。PAS染色實驗原理是胞漿內存在糖原或多糖類物質（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）經過碘酸（periodicacid）氧化，轉變為二醛基（CHO-CHO），與雪夫(Schiff)試劑中的無色品紅結合，形成紫紅色染料而沉積于細胞內多糖所在處。該反應稱為過碘酸-雪夫(PAS)陽性反應，以前也稱為糖原染色。

α-淀粉-酶水溶液(1%)由α-淀粉-酶、磷酸鹽組成，其pH在5.3左右，主要用于糖原PAS染色之前切片處理。糖原消化時需要兩張相同的切片，脫蠟后一張切片用α-淀粉-酶水溶液(1%)處理，另一張僅用PBS或蒸餾水處理，然后兩張切片均用PAS法染色，消化后染色消失表明存在糖原。主要用于消化淀粉，鑒別黏液物質（如黏蛋白和糖原）。該產品僅用于科研實驗，不可用作他用。

操作步驟（僅供參考）：

1、 兩張相同切片，二甲苯脫蠟，梯度乙醇入水。

2、 一張切片入37℃淀粉-酶溶液處理1 h。另一張不用淀粉-酶溶液處理，入水中1h作為對照。

3、 流水沖洗兩張切片各。

4、 進行糖原PAS染色步驟