亚洲午夜成人精品无码色欲 I 中文字幕无码精品三级在线电影 I 91热爆在线观看 I 国产精品免费无遮挡无码永久视频 I 成人一区二区三区视频在线观看 I 亚洲精品成人悠悠色影视 I 成a∧人片在线观看无码 I 日韩在线国产 I 国产露脸精品产三级国产av I 狠狠色婷婷久久一区二区三区 I 人人爽久久涩噜噜噜网站 I 亚洲精品一品 I 亚洲丁香婷婷 I 伊人网在线视频 I 99久久久久成人国产免费 I 日韩av片无码一区二区三区不卡 I 五月婷婷毛片 I 亚洲欧美小视频 I 一级国产在线 I 狠狠操狠狠操狠狠操 I 国产 精品 丝袜 I 69国产精品免费视频 I 91片黄在线观 I 久久久激情 I 一人久久 I com黄色片 I 欧美三级黄色录像 I xxx国产精品 I 在线午夜av I 欧美性少妇xxxx极品高清hd I 人人干人人干人人 I 91成人噜噜噜在线播放 I 国产区av在线播放 I 偷拍中文视频 I 日韩在线视频国产

技術文章您的位置:網站首頁 >技術文章 > 蝦堿性磷酸酶使用注意事項
蝦堿性磷酸酶使用注意事項
更新時間:2023-05-16   點擊次數:765次

蝦堿性磷酸酶使用注意事項


蝦堿性磷酸酶(Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)催化DNA和RNA 的5’和3’磷酸單脂的去磷酸化反應,也可水解核糖和脫氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。該酶在分子生物學研究中應用廣泛,如去除DNA和RNA 末端的磷酸基團,用于后續的克隆和探針末端標記。在克隆中,載體經蝦堿性磷酸酶去磷酸化后5’ 端無磷酸基團,因而不可以和自身3’ 端連接。蝦堿性磷酸酶可作用于5’突出端、凹陷端和平末端,也可用來降解PCR反應中的游離dNTP,用于制備測序模板和SNP分析。該蝦堿性磷酸酶在65℃溫育5分鐘即可完-全的、不可逆的失活,因此,在連接或末端標記之后,可以不用去除。基于以上特性,該酶是傳統去磷酸化酶--小牛腸堿性磷酸酶的替代物。


 應用

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

防止克隆載體的自連

制備5′末端標記模板

去除 PCR 產物中的 dNTP 和焦磷酸鹽

 活性定義

 1單位指在25℃條件下,30分鐘能使1μg經 HindIII(產生5’突出末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化標準是指在自連接反應中能抑制>95%的DNA 再連接。


 使用注意事項

 (1)1×SAP Buffer:50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0,1mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃ 溫育。

(2)熱失活:65℃ 加熱 5 分鐘,不可逆失活。該酶通常用于酶切載體的去磷酸化,因其不可逆熱失活特性。當完成去磷酸化反應后,無需再純化產物,可以直接用于后續連接反應。

(3)蝦堿性磷酸酶也可以用來降解PCR反應中的游離dNTP,用于制備測序模板和 SNP 分析。同樣無需純化,可直接用于下游實驗。


網站首頁 關于我們 新聞中心 產品中心 聯系我們
備案號:蘇ICP備16008122號-3   GoogleSitemap   技術支持:環保在線 管理登陸
© 2018 南京信帆生物技術有限公司(www.gebb.cn) 版權所有 總訪問量:736579